真核生物的基因组DNA大量包含了非编码区,也就是不编码蛋白质的序列。而转录过程中RNA合成的片段中仅包含了编码区的序列,这些如同书本的摘要,提炼出了编码蛋白质所需要的信息。因此,通过把mRNA反过来合成cDNA,我们就可以获取到完整的基因信息了,CDNA就是该过程中生成的一种含有全长编码序列的DNA链。
利用cDNA技术可以实现对各种不包含基因组信息的RNA样品(如mRNA、miRNA)进行探针制备,从而进行基因表达谱分析,了解基因在特定生理或病理条件下的表达情况。
此外,cDNA的合成过程中,我们可以加入反向转录酶并且给予针对cDNA合成所需的dNTPs(脱氧核苷三磷酸)和逆向引物,从而对指定基因或全转录组中的RNA进行逆转录PCR扩增,用于基因功能研究和分析疾病的发生机理。
在现代生命科学研究中,CDNA技术已被广泛应用于RNA序列的测序以及定量PCR等实验过程。通过cDNA的制备和扩增,有助于我们更好地理解基因的活动和功能,有助于解决生物学和临床研究中的一些重要问题。